Logo pl.boatexistence.com

Czy powinieneś rozmrażać komórki zwierzęce?

Spisu treści:

Czy powinieneś rozmrażać komórki zwierzęce?
Czy powinieneś rozmrażać komórki zwierzęce?

Wideo: Czy powinieneś rozmrażać komórki zwierzęce?

Wideo: Czy powinieneś rozmrażać komórki zwierzęce?
Wideo: Freezing Cells: Cell Culture Basics 2024, Lipiec
Anonim

Wytyczne dotyczące rozmrażania komórek

  1. Szybko rozmrozić zamrożone komórki (< 1 minuta) w łaźni wodnej o temperaturze 37°C.
  2. Rozmrożone komórki należy powoli rozcieńczyć przed ich inkubacją, używając wstępnie ogrzanej pożywki wzrostowej.
  3. Płytkowe rozmrożone komórki o wysokiej gęstości w celu optymalizacji regeneracji.
  4. Zawsze stosuj odpowiednią technikę aseptyczną i pracuj w okapie z przepływem laminarnym.

Dlaczego rozmrażanie komórek zostało zakończone?

Właściwe rozmrażanie komórek jest niezbędne, aby utrzymać żywotność kultury i umożliwić jej szybszy powrót do zdrowia. Niektóre krioprotektanty, takie jak DMSO, są toksyczne powyżej 4 °C. Dlatego ważne jest, aby kultury były szybko rozmrażane i rozcieńczane w pożywce hodowlanej, aby zminimalizować efekty toksyczne.

Jak wygląda proces rozmrażania?

Rozmrażanie to proces przenoszenia zamrożonego produktu z zamrożonego do temperatury (zwykle powyżej 0°C), w której nie ma resztek lodu, tj. „rozmrażanie”. Rozmrażanie jest często uważane po prostu za odwrócenie procesu zamrażania.

Jaki jest najlepszy sposób na zamrożenie komórek?

Zamrażaj komórki powoli, zmniejszając temperaturę o około 1°C na minutę za pomocą krio-zamrażarki o kontrolowanej szybkości lub pojemnika do krio-zamrażania, takiego jak „Mr. Frosty”, dostępne w firmie Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Zawsze używaj zalecanego medium zamrażającego.

Jak rozmrozić komórkę podstawową?

Wytrzyj zewnętrzną część fiolki z komórkami 70% etanolem lub izopropanolem. W szafie bezpieczeństwa biologicznego przekręć nakrętkę o ćwierć obrotu, aby zmniejszyć ciśnienie wewnętrzne, a następnie dokręć ponownie. Szybko rozmroź komórki w łaźni wodnej o temperaturze 37°C delikatnie obracając fiolkę. Wyjmij fiolkę, gdy pozostanie niewielka ilość lodu.

Zalecana: