Termin odwrócona faza opisuje tryb chromatografii, który jest wprost przeciwieństwem normalnej fazy, mianowicie użycie polarnej fazy ruchomej i niepolarnej [hydrofobowej] stacjonarnej faza. … Krzemionka związana C18 [czasami nazywana ODS] jest najpopularniejszym rodzajem pakowania HPLC z odwróconą fazą.
Co się dzieje podczas HPLC w odwróconym układzie faz?
Chromatografia z odwróconymi fazami wykorzystuje polarną (wodną) fazę ruchomą. W rezultacie cząsteczki hydrofobowe w polarnej fazie ruchomej mają tendencję do adsorbowania na hydrofobowej fazie stacjonarnej, a cząsteczki hydrofilowe w fazie ruchomej przechodzą przez kolumnę i są eluowane jako pierwsze.
Jakie są fazy stacjonarne i ruchome w HPLC z odwróconą fazą?
W chromatografii z odwróconymi fazami, która jest bardziej powszechną formą HPLC, faza stacjonarna jest niepolarna, a faza ruchoma jest polarna.
Dlaczego preferowana jest HPLC z odwróconą fazą?
Chromatografia z odwróconą fazą zapewnia lepszą rozpuszczalność analitów polarnych, wykorzystuje nietoksyczne rozpuszczalniki, oferuje metodę usuwania zanieczyszczeń i dodatków fazy ruchomej oraz zapewnia szybkie odzyskiwanie próbki przy niewielkiej ilości rozpuszczalnika parowanie.
Jaka jest różnica między HPLC z normalną i odwróconą fazą?
Kluczowa różnica między HPLC z odwróconą fazą a fazą normalną polega na tym, że HPLC z odwróconą fazą wykorzystuje niepolarną fazę stacjonarną i polarną fazę ruchomą, podczas gdy HPLC z normalną fazą wykorzystuje polarną fazę stacjonarną faza i mniej polarna faza ruchoma.