Logo pl.boatexistence.com

Jak zmniejszyć barwienie tła w immunofluorescencji?

Spisu treści:

Jak zmniejszyć barwienie tła w immunofluorescencji?
Jak zmniejszyć barwienie tła w immunofluorescencji?

Wideo: Jak zmniejszyć barwienie tła w immunofluorescencji?

Wideo: Jak zmniejszyć barwienie tła w immunofluorescencji?
Wideo: Optimize your immunofluorescent staining: Tips to overcome background interference 2024, Może
Anonim

Aby zredukować nieswoiste wiązanie przeciwciał, a w konsekwencji zredukować sygnał tła, zaleca się użycie roztworu blokującego przed inkubacją z przeciwciałami Najskuteczniejszy roztwór blokujący będzie być to zawierające surowicę z tego samego gatunku, w którym wyhodowano przeciwciało drugorzędowe.

Jak zapobiegasz plamom w tle?

Zmniejszanie grubości skrawków tkanki może pomóc w ograniczeniu przebarwień tła. Spróbuj wyciąć cieńsze sekcje, aby uzyskać czystsze IHC. Ważne jest również, aby uważać, aby nie dopuścić do wyschnięcia skrawków, ponieważ suszenie może spowodować silne niespecyficzne barwienie.

Jak zoptymalizować immunofluorescencję?

Mikroskopia immunofluorescencyjna: 10 technicznych wskazówek, jak osiągnąć sukces

  1. Utrwalanie komórek i permeabilizacja. …
  2. Swoistość przeciwciał. …
  3. Użyj odpowiedniego rozcieńczenia przeciwciał. …
  4. Optymalizacja buforów i agentów blokujących. …
  5. Korzystanie z odpowiedniej gęstości komórek. …
  6. Wielokrotne barwienie. …
  7. Wtórne przeciwciała. …
  8. Zmniejszanie tła.

Co powoduje plamienie tła?

Zabarwienie tła może być spowodowane nieodpowiednim wiązaniem przeciwciał lub błędami podczas przygotowywania szkiełka tkankowego.

Czy przeciwciała wtórne redukują sygnały tła?

F(ab) specyficzne przeciwciała drugorzędowe mogą pomóc w zmniejszeniu sygnału tła poprzez eliminację niespecyficznego wiązania białek IgG znajdujących się w tkankach przez przeciwciała drugorzędowe.

Zalecana: