Worteks nie będzie ścinał twojego RNA aby uczynić go bezużytecznym, jeśli wykonujesz RT z losowym primingiem - tylko jeśli chcesz sklonować długie mRNA. Wsparcie techniczne Invitrogen jest również poprawne. Chloroform jest cięższy niż Trizol i opada na dno tuby.
Czy worteksowanie RNA jest bezpieczne?
Nie należy worteksować lizatów Trizol ani próbek RNA, aby uniknąć ścinania. Po ekstrakcji trzymaj próbki RNA na lodzie przez cały czas. Ten protokół jest przeznaczony dla próbek poddanych lizie 1 ml Trizolu w probówce 1,5 lub 2 ml.
Czy możesz podgrzewać RNA?
Dlatego należy unikać wysokich temperatur ( powyżej +65°C), ponieważ wpływają one na integralność RNA. Zamiast tego, aby stopić struktury drugorzędowe, podgrzej RNA do +65°C przez 15 minut w obecności buforów denaturujących.
Jak ponownie zawiesić peletki RNA?
zawieś pellet w ciepłej wodzie (40-50 st. Celc). inkubować w 45 st. celc przez 10 min. umieść je w +4 na 4-6 godzin.
Jak wytrącasz RNA?
A.
Po dostosowaniu stężenia soli RNA można wytrącić przez dodanie 2,5 objętości etanolu lub 1 objętości izopropanolu i dokładne wymieszanie, następnie schładzanie przez co najmniej 15 minut w temperaturze -20°C.
