Logo pl.boatexistence.com

Jak wykonać immunofluorescencję?

Spisu treści:

Jak wykonać immunofluorescencję?
Jak wykonać immunofluorescencję?

Wideo: Jak wykonać immunofluorescencję?

Wideo: Jak wykonać immunofluorescencję?
Wideo: Immunofluorescence 2024, Może
Anonim

Poniżej znajduje się przegląd różnych etapów protokołu pośredniego barwienia immunofluorescencyjnego

  1. Planowanie eksperymentu i przygotowanie próbki. …
  2. Umocowanie próbki. …
  3. Przepuszczalność komórek. …
  4. Blokowanie. …
  5. Inkubacja przeciwciał pierwotnych. …
  6. Inkubacja przeciwciał wtórnych. …
  7. Kontrast i mocowanie.

Jak wykonać immunofluorescencję?

Wszystkie etapy inkubacji odbywają się w temperaturze pokojowej

  1. Umyj komórki dwukrotnie i użyj pęsety, aby ostrożnie umieścić szkiełko nakrywkowe z odwróconymi komórkami do nawilżonej komory.
  2. Utrwal 4% formaldehydem przez 10 minut i umyj 3 ×.
  3. Permeabilizuj za pomocą 0,1% TX-100/PBS przez 15–20 minut i przemyj 3 ×.

Jak wykorzystać immunofluorescencję w komórce?

Protokół immunofluorescencyjny dla komórek przylegających

  1. Posiew 1–1,5 x104 komórek na studzienkę 4-komorowego szkiełka w 500 mL pożywki hodowlanej. Inkubować w 37°C przy 5% CO2.
  2. 32–36 godzin po wysianiu komórek, usuń pożywkę do hodowli komórkowej i wypłucz komórki 3 razy przy użyciu 500 µL 1X PBS.

Jaki jest przykład immunofluorescencji?

Na przykład badacz może stworzyć przeciwciała pierwotne u kozy, które rozpoznają kilka antygenów, a następnie zastosować sprzężone z barwnikiem przeciwciała królicze, które rozpoznają region stały przeciwciała koziego ( królicze przeciwciała przeciw kozie).

Jakie jest zastosowanie barwienia immunofluorescencyjnego?

Barwienie immunofluorescencyjne (IF) jest szeroko stosowaną techniką w badaniach biologicznych i diagnostyce klinicznej IF wykorzystuje przeciwciała znakowane fluorescencyjnie w celu wykrywania określonych antygenów docelowych. Po obrazowaniu jest to bardzo bezpośrednia technika, ponieważ można rzeczywiście coś zobaczyć.

Zalecana: