Elektroforeza w żelu agarozowym jest powszechnie stosowana do oddzielenia fragmentów DNA po restrykcyjnym trawieniu endonukleazą lub amplifikacji PCR. Fragmenty są wykrywane przez barwienie żelu interkalującym barwnikiem, bromkiem etydyny, a następnie wizualizację/fotografowanie w świetle ultrafioletowym.
Jak używać żelu agarozowego w elektroforezie?
1. Przygotowanie żelu
- Odważ odpowiednią masę agarozy do kolby Erlenmeyera. Żele agarozowe wytwarza się stosując roztwór procentowy wag./obj. …
- Dodaj bieżący bufor do kolby zawierającej agarozę. Zamieszać, aby wymieszać. …
- Rozpuść mieszaninę agarozy/bufora. …
- Dodaj bromek etydyny (EtBr) do stężenia 0,5 μg/ml.
Jak używać elektroforezy żelowej?
Kluczowe punkty:
- Elektroforeza żelowa to technika stosowana do rozdzielania fragmentów DNA w zależności od ich wielkości.
- Próbki DNA są ładowane do dołków (wgłębienia) na jednym końcu żelu, a prąd elektryczny jest doprowadzany do ich przeciągnięcia przez żel.
- Fragmenty DNA są naładowane ujemnie, więc poruszają się w kierunku elektrody dodatniej.
Jaka jest główna funkcja elektroforezy żelowej?
Elektroforeza żelowa jest metodą laboratoryjną używaną do rozdzielania mieszanin DNA, RNA lub białek w zależności od rozmiaru cząsteczki.
Do czego służy elektroforeza?
Elektroforeza to technika laboratoryjna używana do oddzielania cząsteczek DNA, RNA lub białek w oparciu o ich rozmiar i ładunek elektryczny. Prąd elektryczny jest używany do przemieszczania cząsteczek, które mają zostać oddzielone przez żel.